●考点 棒状杆菌属（白喉棒状杆菌）、炭疽芽胞杆菌、蜡样芽胞杆菌、产单核李斯特菌 生物学性状 临床意义 微生物学检查
一、棒状杆菌属 G+，杆菌，菌体粗细、长短不一，一端或两端膨大呈棒状。 着色不匀，有异染颗粒。无鞭毛、无荚膜、无芽胞。 需氧，营养要求较高。 引起人类致病的主要是白喉棒状杆菌，其他大多数为条件致病菌。 （一）白喉棒状杆菌 1.生物学性状 （1）形态与染色： 菌体细长微弯，一端或两端膨大的革兰阳性杆菌。细菌排列呈散在L、V、Y字形及不规则栅栏状。无荚膜、无芽胞、无鞭毛、无菌毛。异染颗粒：Neisser（奈瑟）染色；Albert（阿培特）染色。这是白喉棒状杆菌的形态学特征，对鉴别细菌有重要意义。 异染颗粒（浓染颗粒） Neisser（奈瑟）染色： 菌体染成黄褐色，颗粒被染成紫黑色； Albert（阿培特）染色： 菌体呈蓝绿色，异染颗粒蓝黑色。
（2）培养特性： 在普通培养基上生长不良，形态不典型。 1）血液琼脂平板：灰白色S型菌落，有狭窄的β溶血环。 2）吕氏（Loeffler）血清斜面培养基：生长迅速，形成灰白色、湿润、S型菌落。涂片染色形态典型，异染颗粒明显。 3）亚碲酸钾血琼脂：本菌能吸收亚碲酸盐，并使其还原为元素碲，使菌落呈黑色。 4）液体培养基。 （3）生化反应： 触酶试验阳性，氧化酶试验阴性。 分解葡萄糖、麦芽糖、果糖、半乳糖，产酸不产气。不分解乳糖，极少分解蔗糖。 能还原硝酸盐，不液化明胶，不产生吲哚，不分解尿素。 据亚碲酸钾血琼脂培养基、肉汤培养基的生长特点及生化反应，可将本菌分为轻、中、重三型。在我国以轻型多见。 分型与所致疾病的严重程度无关，可用于流行病学调查。 2.致病性 致病物质： 白喉棒状杆菌引起白喉，多在秋冬季节流行。以咽白喉最常见，喉白喉及鼻白喉次之，偶亦引起眼结膜、外耳道、阴道及皮肤的局部病变。 本菌一般不侵入血流，但其产生的大量外毒素可吸收入血，引起毒血症。毒素能与敏感的心肌、肝、肾、肾上腺等组织细胞及外周神经，尤其与支配咽肌和腭肌的神经结合，引起细胞变性、坏死、内脏出血和神经麻痹等严重损害，是白喉晚期死亡的主要原因。 免疫性： 白喉的免疫主要是抗毒素免疫，同时巨噬细胞吞噬消化能力也加强。 调查人群在感染或计划免疫后对白喉是否产生免疫力，可用锡克试验或致敏红细胞凝集试验。
（3）生化反应： 主要用于鉴别白喉棒状杆菌与类白喉棒状杆菌。 尿素分解试验：白喉棒状杆菌（-），类白喉棒状杆菌（+）。 （4）毒力试验：可作为鉴定致病菌株的重要依据。 体外法：Elek平板毒力测定、SPA协同凝集试验、对流免疫电泳。 体内法：可用豚鼠作毒素中和试验。 （5）临床意义：白喉杆菌的致病因素为白喉外毒素，抗原性强，毒性剧烈。K抗原（表面抗原）及索状因子亦与其致病力有关。引起的白喉是一种急性呼吸道传染病。白喉的免疫主要是抗毒素免疫。白喉棒状杆菌可引起人类白喉，白喉是一种急性呼吸道传染病，该病原菌存在于患者及带菌者的鼻咽腔中，随飞沫或污染的物品传播。白喉棒状杆菌可致气管、支气管假膜，是白喉早期死亡的主要原因，其产生的外毒素也经血液与易感组织结合，出现各种症状如心肌炎、软腭麻痹等，是白喉晚期死亡的主要原因。 （6）治疗原则： 用青霉素或红霉素等进行抗感染治疗，同时应尽早注射足量白喉抗毒素。 注射抗毒素前，应做皮试。 （二）其他棒状杆菌 棒状杆菌除白喉棒状杆菌外，其余统称为类白喉棒状杆菌。 一般无致病性或仅能与其他化脓细菌产生混合感染，有的可能为条件致病菌。 类白喉棒状杆菌常寄生于人类或动物鼻腔、咽喉、外耳道、眼结膜、外阴及皮肤表面等处。 二、芽胞杆菌属 有芽胞的革兰阳性大杆菌。大多数菌种在有氧环境下形成芽胞。有动力，非抗酸性。 需氧或兼性厌氧菌，在普通培养基上生长良好。 炭疽杆菌是人畜共患的重要致病菌，蜡样芽胞杆菌能致食物中毒。 （一）炭疽芽胞杆菌 人畜共患的急性传染病。 1.生物学特性 （1）形态与染色： 致病菌中最大的革兰阳性杆菌，两端齐平，呈竹节状。在组织内生长呈单个或短链，试管内可形成长链。 无鞭毛，机体内或含血清培养基上可形成荚膜。人工培养或在外界环境中易产生芽胞，形状椭圆，位于菌体中央，其直径小于菌体。 （2）培养特性： 专性需氧。 普通琼脂平板：形成灰白色、不透明、无光泽、边缘不整齐、大而扁平的粗糙型菌落，在低倍镜下观察，呈卷发状。 血液琼脂平板：出现轻微溶血。 普通肉汤：管底有絮状卷绕成团的沉淀物生长，表面稍混但不形成菌膜，中层肉汤清亮。 碳酸氢钠琼脂平板： 有毒株-形成黏稠、有光泽的黏液型（M型）菌落，这是有荚膜的菌体构成的。无毒株-粗糙型（R型）。 （3）生化反应： 分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖，产酸不产气，不分解乳糖。 不产生靛基质及H2S。 能迟缓液化明胶，沿穿刺线向四周扩散，形如倒松树状。 （4）抗原构造： ①菌体多糖抗原； ②荚膜多肽抗原； ③芽胞抗原； ④炭疽毒素抗原。 （5）本菌芽胞体抵抗力很强，在干燥土壤或皮毛中常温下可存活数十年。一般对碘及氧化剂较敏感。 2.致病性： 毒力因子：荚膜和炭疽毒素。炭疽毒素是致死的主要因素。 所致疾病：皮肤炭疽、肺炭疽、肠炭疽，病死率很高。 免疫性：病后可获得持久性免疫力，再感染者少见。
（二）蜡样芽胞杆菌 1.生物学性状 G+大杆菌，呈链状排列，芽胞位于菌体中心或次末端不突出菌体。 引起食物中毒的菌株多为周毛菌，不形成荚膜。 营养要求不高，菌落较大，表面粗糙似毛玻璃状或融蜡状。 2.临床意义 大量的蜡样杆菌污染（～/g）可致食物中毒，有腹泻型与呕吐型之分。 3.微生物检验 除作分离培养外，细菌计数对本菌所致食物中毒有诊断价值。 三、产单核李斯特菌 （一）生物学特性 1.形态染色： 菌体短小大小，常呈V字形或成对排列，偶呈丝状。 有鞭毛、无芽胞，20℃有动力，37℃动力缓慢，一般不形成荚膜。 幼龄菌呈革兰阳性，陈旧培养物多转为革兰阴性。 2.培养特性： 需氧或兼性厌氧，营养要求不高。 血琼脂平板：形成小而透明的S型菌落，有狭窄的β溶血环。 因其能生长于4℃，故可进行冷增菌。 半固体培养基：出现倒伞形生长。 3.生化反应 不发酵甘露醇和木糖，硝酸盐还原阴性，CAMP阳性。 可发酵多种糖类，触酶阳性，不形成吲哚，不分解尿素，能水解七叶苷。 4.根据菌体及鞭毛抗原的不同，可分4个血清型。 5.本菌耐碱不耐酸。对热较为敏感，加热50℃10分钟可死亡。 （二）致病性 致病物质主要是溶血素和菌体表面成分。 由带菌动物或人粪便污染动物制品，而经口感染。通过胎盘或产道感染新生儿是本病的重要特点。宫内感染常可导致流产、死胎及新生儿败血症，死亡率较高。 本菌常伴随EB病毒引起传染性单核细胞增多症，此外可引起脑膜炎。 机体主要靠细胞免疫功能清除本菌。 （三）微生物检验 1.标本采集 根据感染部位不同而采取相应标本。 2.检验方法与鉴定 （1）分离培养：将标本接种两支脑心浸液培养基中。分别置37℃和4℃培养。转种血平板上。从血平板上挑取β溶血环的菌落，做涂片染色镜检并进一步鉴定。 （2）鉴定： 在血琼脂上有狭窄的β溶血环，25℃动力最强，在半固体培养基上呈伞状生长，可在4℃冷增菌生长，木糖、甘露醇和H2S阴性。CAMP（与金黄色葡萄球菌协同溶血）阳性。触酶阳性。 四、丹毒丝菌属 红斑丹毒丝菌为革兰阳性杆菌，单个存在或形成短链。 无芽胞、无鞭毛、无荚膜。 厌氧或微需氧菌，初次分离要在厌氧环境中培养。 血琼脂平板形成两种菌落：光滑型菌落-细小、圆形、突起有光泽；粗糙型菌落-大，表面呈颗粒状。 触酶试验阴性。48小时发酵葡萄糖、乳糖，产酸不产气。 对湿热及化学消毒剂敏感。 红斑丹毒丝菌引起红丹毒丝病，感染局部的皮肤发红、肿胀、疼痛、或有痒感。也可引起急性败血症或心内膜炎。 本菌对青霉素、头孢菌素、红霉素和四环素等药敏感。 五、阴道加特纳菌 引起非淋菌性阴道炎的主要病原菌之一。 新鲜标本分离菌株趋向革兰染色阳性，保存菌株趋向革兰染色阴性。本菌无芽胞、无荚膜、无鞭毛，多形性。 营养要求较高，在5%人血平板上，在3%～5%C02、可形成针尖大小菌落，在人血和兔血平板上可出现β溶血环。 对氨苄西林、羧苄西林、苯唑西林、青霉素、万古霉素和甲硝唑敏感。对萘啶酸、新霉素、粘菌素和磺胺嘧啶耐药。
本章小结：
一、白喉棒状杆菌 二、炭疽芽胞杆菌 三、产单核李斯特菌、红斑丹毒丝菌、阴道加特纳菌
小试牛刀
一、A1
1、在固体培养基上生长出现卷发状菌的细菌是（ ）。
A、炭疽芽胞杆菌
B、肉毒梭菌
C、脆弱杆菌
D、棒状杆菌
E、蜡样芽胞杆菌
A
炭疽芽胞杆菌是专性需氧，在普通培养基上生长良好。生长适温35～37℃，pH7.0～7.4。在琼脂平板上经37℃，18～24h培养后，形成灰白色、不透明、无光泽、边缘不整齐、大而扁平的粗糙型菌落，在低倍镜下观察，呈卷发状。
2、下列关于肺炭疽的叙述正确的是（ ）。
A、由炭疽杆菌引起
B、革兰染色阴性
C、厌氧菌
D、营养要求高
E、抵抗力低
A
炭疽芽胞杆菌是G+大杆菌，专性需氧，在普通培养基上生长良好，本菌芽胞体抵抗能力强，可致人类皮肤炭疽、肺炭疽、肠炭疽等。
3、对于炭疽芽胞杆菌，以下说法正确的是（ ）。
A、只能引起食草动物患炭疽病
B、是致病菌中最大的革兰阴性杆菌
C、菌体两端齐平，呈竹节状
D、在所有培养基中均形成荚膜
E、不易形成芽胞
C
炭疽芽胞杆菌主要引起食草动物患炭疽病，也可经一定途径感染人类，为人畜共患的急性传染病。是致病菌中最大的革兰阳性杆菌。两端齐平，呈竹节状。在组织内生长呈单个或短链，试管内可形成长链，无鞭毛，机体内或含血清培养基上可形成荚膜。人工培养或在外界环境中易产生芽胞，形状椭圆，位于菌体中央，其直径小于菌体。
4、一婴儿患化脓性脑膜炎，CSF培养为革兰阳性小杆菌，血平板培养18～24小时，菌落灰白色有狭窄透明溶血环，半固体培养基上出现倒伞状生长，初步诊断为（ ）。
A、流感嗜血杆菌
B、溶血棒状杆菌
C、枯草芽胞杆菌
D、产单核细胞李斯特菌
E、红斑丹毒丝菌
D
产单核细胞李斯特菌的培养特性为：需氧或兼性厌氧，营养要求不高，在血琼脂平板上35℃培养数天后形成小而透明的S型菌落，周围有狭窄的β溶血环。因其能生长于4℃，因此可进行冷增菌。在半固体培养基中可出现倒伞形生长。通常在25℃培养时，显示有动力。
二、A2
1、某皮革厂工人剥了一只死羊的皮后，手臂先出现了丘疹，次日疹顶部出现水疱，内含金黄色液体，周围组织明显肿胀，硬而不凹陷，随后中心区呈现出血性坏死，四周有成群的小水疱。取出疱的分泌物涂片进行革兰染色和荚膜染色。镜检发现有荚膜的革兰阳性竹节状大杆菌。根据上述情况分析，此工人是感染了（ ）。
A、蜡样芽胞杆菌
B、枯草芽胞杆菌
C、多黏芽胞杆菌
D、嗜热脂肪芽胞杆菌
E、炭疽芽胞杆菌
E
炭疽芽胞杆菌主要引起食草动物患炭疽病，也可经一定途径感染人类，为人畜共患的急性传染病。是致病菌中最大的革兰阳性杆菌，两端齐平，呈竹节状。经革兰染色和荚膜染色，镜检发现有荚膜的革兰阳性竹节状大杆菌，可初步诊断。炭疽芽胞杆菌可经皮肤、呼吸道和胃肠道侵入机体引起炭疽病。临床类型有皮肤炭疽、肺炭疽、肠炭疽，病死率很高。
2、5岁女性农村患儿，发热5日，咽痛。免疫接种史不祥。检查，在咽后壁、腭弓和悬雍垂等处发现灰白色膜状物。涂片可见革兰阳性棒状杆菌，并有明显异染颗粒，初步诊断为（ ）。
A、白喉
B、急性喉炎
C、病毒性咽炎
D、扁桃体炎
E、支气管炎
A
白喉棒状杆菌为革兰阳性棒状杆菌，并有明显异染颗粒。
3、一渔民手被鱼刺刺伤，皮肤红肿，疼痛，并有淋巴管发炎，培养在血平板长出细小菌落，镜下为革兰阳性杆菌，丝状可分枝，触酶阴性，氧化酶阴性，分解葡萄糖、乳糖，三糖铁中产生H2S，它是（ ）。
A、放线菌
B、奴卡氏菌
C、红斑丹毒丝菌
D、棒状杆菌
E、结核杆菌
C
红斑丹毒丝菌为革兰阳性杆菌，丝状可分枝，触酶阴性，氧化酶阴性，分解葡萄糖、乳糖，三糖铁中产生H2S。
三、B
1、A.毒血症B.菌血症C.败血症D.脓毒血症E.内毒素血症
1、伤寒病早期体内出现（ ）。
A、
B、
C、
D、
E、
B
沙门菌属的致病因素有侵袭力、内毒素和肠毒素3种。临床上可引起胃肠炎、肠热症、菌血症或败血症等。其中，肠热症即伤寒与副伤寒病。由伤寒与副伤寒沙门菌所引起的慢性发热症状。其早期在体内出现的是菌血症。
2、革兰阴性病原菌引起（ ）。
A、
B、
C、
D、
E、
E
内毒素是革兰阴性细菌细胞壁中的一种成分，叫做脂多糖。脂多糖对宿主是有毒性的。内毒素只有当细菌死亡溶解或用人工方法破坏菌细胞后才释放出来，所以叫做内毒素。内毒素休克当病灶或血流中革兰阴性病原菌大量死亡，释放出来的大量内毒素进入血液时，可发生内毒素血症。
3、金黄色葡萄球菌引起（ ）。
A、
B、
C、
D、
E、
D
金黄色葡萄球菌常引起疖、痈、外科伤口、创伤的局部化脓性感染，播散入血后可引起深部组织的化脓性感染，如脓毒血症。此外，其产生的肠毒素可引起食物中毒，表现为急性胃肠炎。
4、破伤风杆菌引起（ ）
A、
B、
C、
D、
E、
A
破伤风杆菌是革兰阳性芽胞菌，在局部繁殖后可产生大量的毒素。毒素进入血液导致毒血症，从而产生一系列严重症状，病情极为危急，病死率约10%。
5、白喉杆菌引起（ ）。
A、
B、
C、
D、
E、
A
白喉棒状杆菌引起白喉，多在秋冬季节流行。以咽白喉最常见，喉白喉及鼻白喉次之，偶亦引起眼结膜、外耳道、阴道及皮肤的局部病变。此菌一般不侵入血流，但其产生的大量外毒素可吸收入血，引起毒血症。
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