衣原体及检验一、衣原体 概念：一群体积较小，能通过细菌滤器，细胞内专性寄生，并有独特发育周期的原核细胞型微生物。由于它具有一些与细菌类似的生物学特性，现归属于广义的细菌范畴。 分类及命名：二、生物学性状1.发育繁殖周期与形态染色 衣原体在宿主细胞内生长繁殖有独特的发育周期，可见到两种形态结构不同的颗粒。 衣原体原体和始体的性状比较：性状原体始体大小0.3μm0.5～1μm细胞壁+-致密的核质+-姬姆萨染色紫色蓝色Macchiavello染色红色蓝色代谢活性-+胞外稳定性+-感染性+-繁殖能力-+ 衣原体的发育周期：2.抗原成分 （1）属特异性抗原：衣原体细胞壁LPS为属特异性补体结合抗原。其与革兰阴性菌LPS结构不同，无典型内毒素生物学活性。长期应用于衣原体血清学诊断。 （2）种特异性抗原：主要位于外膜蛋白（MOMP）上，可鉴别不同种衣原体。 （3）型特异性抗原：也位于MOMP上，用单克隆抗体作微量免疫荧光试验可识别衣原体各血清型。3.分离培养特性： 专性细胞内寄生。 绝大多数能在6～8日龄鸡胚卵黄囊中生长繁殖，并可在卵黄囊膜中找到包涵体、原体和始体颗粒。 可在传代细胞（如HeLa-和McCoy等细胞株）中培养。4.抵抗力： 抵抗力弱。35℃～37℃，经48小时左右即失去活性。 不耐热，加热50℃经30分钟或56℃～60℃5～10分钟可杀死。 耐寒。 对四环素、青霉素、红霉素、螺旋霉素、利福平较敏感。三、临床意义 （一）沙眼衣原体1.沙眼 由沙眼生物亚种A、B、Ba和C四个血清型引起。主要通过眼-眼或眼-手-眼（常通过公用毛巾等媒介）的途径进行直接或间接接触传播。2.包涵体结膜炎 由沙眼生物亚种B、Ba、D、Da、E、F、G、H、I、Ia、J、K血清型引起。包括婴儿及成人两类。婴儿经产道时该亚种可致包涵体结膜炎和婴幼儿肺炎。3.泌尿生殖道感染 主要由沙眼生物亚种D-K血清型引起，是经性接触传播引起的非淋菌性泌尿生殖道感染的主要病原。4.性病淋巴肉芽肿 由沙眼衣原体LGV生物亚种L（L1、L2、L2a、L3）血清型引起，主要通过性接触传播。引起以化脓性腹股沟淋巴结炎为特征的性病，又称第四性病。主要侵犯淋巴组织，发生化脓性炎症和慢性肉芽肿，有些可形成瘘管。 （二）鹦鹉热衣原体 主要引起鸟类或家禽感染，以气溶胶形式传给人类。使人类发生上呼吸道感染、肺炎和毒血症。 典型临床表现为非典型肺炎。也有引起心内膜炎的报道。 （三）肺炎衣原体 主要是人与人之间经飞沫或呼吸道分泌物传播。引起青少年急性呼吸道感染，以肺炎为主，常可呈地方性、散发性流行，也可引起支气管炎、咽炎等。四、微生物学检验1.标本采集与处理 （1）沙眼衣原体： 沙眼和包涵体结膜炎的患者，取眼穹隆部及睑结膜病灶作刮片。子宫颈炎取子宫颈刮片上皮细胞或分泌物作涂片。 性病淋巴肉芽肿患者可取腹股沟淋巴结脓液，也可取直肠拭子或活检材料送检。 （2）鹦鹉热衣原体： 采取患者血液、痰液或咽喉含漱液，尸检材料取肝、脾、肺等组织，也可采腹腔和心包渗出液。 （3）肺炎衣原体： 拭子经鼻前庭插入鼻咽部，也可采集气管内痰液或肺泡灌洗液。2.直接显微镜检查 包涵体即指在易感细胞内含增殖的始体和子代原体的空泡。染色镜检，寻找上皮细胞细胞质内的包涵体，对鉴别衣原体有意义。沙眼衣原体肺炎衣原体鹦鹉热衣原体吉姆萨染色空泡形卵圆形卵圆形，多形性碘液染色+--荧光抗体染色抗LPS单抗检测上皮细胞内的衣原体抗原3.酶免法检测抗原 可检测临床标本中的可溶性抗原。4.核酸检测 利用PCR、核酸探针技术进行检测。5.分离培养 （1）鸡胚卵黄囊接种：将检查标本加适当抗生素处理后接种于鸡胚卵黄囊分离培养。 （2）细胞培养： 沙眼衣原体多用McCoy细胞，鹦鹉热衣原体适合用Hela细胞系进行培养。肺炎衣原体适合用HEP-2和HL细胞系进行培养。 （3）小白鼠接种：主要用于鹦鹉热衣原体的分离。用小鼠腹腔、颅内或滴鼻接种。6.检测抗体 用补体结合试验、微量免疫荧光法、酶免法检测抗体。
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